郭睿　郎旭宇　宋玉兰

　　近来Shau发现红细胞能够显著增强NK细胞的杀伤活性，并证明这一功能与红细胞膜无关，而依赖于红细胞胞浆中的自然杀伤增强因子(natural killer enhancing factor,NKEF)〔1〕。本工作即在此基础上对正常人及肺癌患者的红细胞促NK细胞活性功能进行了初步检测，为红细胞抗肿瘤免疫研究积累了资料。

材料与方法

　　1.研究对象：健康体检合格者，男36例，女14例，平均年龄48±11岁。山西省肿瘤医院临床确诊肺癌患者，男34例，女6例，平均年龄52±10岁。采血前未经治疗，无其它合并症。

　　2.主要试剂：NK细胞敏感细胞株K562和Ficoll淋巴细胞分离液由中国医学科学院提供，3 H-TdR标记由上海原子能研究所提供。

　　3.NK细胞活性测定：常规分离单个核细胞，采用3 H-TdR释放法〔2〕测定NK细胞活性。

　　4.红细胞对NK细胞活性的影响：参见文献〔1〕。吸取Ficoll离心后的沉淀红细胞1ml,Hanks液洗涤3次，加10倍体积的无菌蒸馏水溶胀破膜，以14000 r/min离心15分钟，所得上清称之为红细胞液(含NKEF)。在96孔圆底培养板中每孔加入上清100μl,37℃温箱内放置1小时，PBS缓冲液冲洗甩干，加入RPMI 1640培养基100μl,37℃温箱1小时，取出后移去培养基，分别加入淋巴细胞和靶细胞各100μl，按3 H-TdR释放法测定NKEF包板后NK细胞的活性。

结果与讨论

　　红细胞通过释放NKEF参与机体抗肿瘤免疫调控，是红细胞抗肿瘤免疫研究的新发现。NKEF是红细胞胞浆内的一种可溶性蛋白，能显著增强NK细胞杀伤活性。从本文结果可看到，当效应细胞与靶细胞比分别为20∶1，40∶1，80∶1时，正常人的NKEF对自身NK细胞活性均有明显的促进作用，其中以40∶1时最为显著。NKEF通过增强NK细胞的杀伤活性，使机体能够及早清除恶变细胞，在监测肿瘤的发生及抑制肿瘤细胞生长和转移发挥重要作用，所以NKEF也是机体免疫调控系统的成员。

　　从附图可看出肺癌患者机体NK细胞活性显著低于正常人，还发现在不同效靶比例下，其NKEF对自身NK细胞活性无增强作用。有关患者与正常人NKEF的差异是量的区别，还是质的区别有待进一步研究。

　　NKEF促NK细胞活性功能的发现，对全面认识机体的免疫系统和免疫调控机理具有重要意义，对肿瘤免疫学的研究亦将有推动作用。

　　作者单位：030001 太原，山西医科大学细胞生物学教研室(郭睿，宋玉兰)；山西省煤炭中心医院心胸外科(郎旭宇)

参　考　文　献

1　Shau H,Gupta RK,Golub SH.Identification of a natural killer enhancing factor from human erythroid cells.Cell Immunol,1993,147∶1-11.
2　吴厚生，谢琪，姜小玲，等.用3 H-TdR释放法测量细胞介导的细胞毒功能.上海免疫学杂志，1987，7(4)∶230-232.

(收稿：1997-05-04　　修回：1997-09-08)




附图　红细胞胞液对NK细胞活性的影响

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