文秀英 徐保国 刘浩
摘要 目的：探讨穿山甲对大鼠离体心脏功能和体外血小板聚集性的影响。方法：制备大鼠离体工作心脏、观察K-H灌注液中加入穿山甲前后的心功能指标变化，并设立对照组；采用15名冠心病患者的静脉血制备富血小板血浆和贫血小板血浆，每一标本分成三部分供三组使用：穿山甲组、阿司匹林组和对照组，以ADP诱导血小板聚集。结果：大鼠离体工作心脏灌注液中加入穿山甲液后，LVSP，+dp/dtmax和CO显著增加，-dp/dtmax,LVEDP及CF无显著变化，这些指标在对照组中无显著变化。与对照组比较，穿山甲和阿司匹林组的血小板聚集百分率显著降低。结论：穿山甲增强心肌收缩功能、有正性肌力作用，还能显著抑制血小板聚集。
关键词 穿山甲 离体工作心脏 心脏收缩和舒张功能 血小板聚集
Effects of Squama Manitis on Cardiac Systolic Function and Platelet Aggregation
Wen Xiuying,Xu Baoguo and Liu Hao (Liyuan Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430077)
Abstract Objective:To study the effect of Squama Manitis(S.M.)on cardiac function and platelet aggregation in vitro.Method:Isolated working rat hearts were prepared,and cardiac performance was measured before and after adding S.M. in the Krebs-Hensleit(K-H) perfusion buffer.Controls with K-H buffer were also investigated. Rich platelet plasma and Poor platelet plasma were centrifuged from the blood of 15 patients with coronary heart disease.Each sample was divided into three parts for use by three groups：control,group of S.M. and group of aspirin.Platelet aggregation was stimulated by adenosine diphosphate.Result:LVSP,＋dP/dtmax and CO of isolated working rat hearts were significantly increased after treating with S.M. liquor.S.M. had no obvious effect on -dP/dtmax and LVEDP.These parameters did not change significantly in the control.Percentages of platelet aggregation were significantly lower in the group of S.M. and the group of aspirin as compared with the control.Conclusion:S.M. increases cardiac systolic function,has positive inotropic effect on myocardium and inhibits platelet aggregation.
Key words Squama Manitis;isolated working heart;cardiac systolic and diastolic function;platelet aggregation
穿山甲属活血化瘀类中药，古书记载穿山甲能治疗“心气痛”［1］，曾见报道穿山甲有延长大白鼠的凝血时间［2］，增加狗股动脉血流量的作用［3］，说明穿山甲对心血管系统有一定的药理效应。本文进一步探讨穿山甲对大鼠离体工作心脏心功能及人血体外血小板聚集性的影响。
1 材料与方法
1.1 药物与制剂 穿山甲为湖北省中药材公司提供，产地广西省，经梨园医院中药研究室副主任药师许明望鉴定为脊椎动物鲮鲤科的穿山甲Manis pentadactyla L.的鳞片。用水提醇沉法制得穿山甲液，每毫升含1g生药，灭菌密封。
1.2 大鼠离体工作心脏的制备及心功能指标观察 Wistar大白鼠，雌性，7～8周龄，体重200～250g，随机分2组，每组8只。对照组：离体心脏持续用Kreb-Hensleit(K-H)液灌注。穿山甲组：离体心脏转入工作状态平衡后于K-H液中加入穿山甲液(终末浓度6mg/ml)。大鼠经腹腔注射戊巴比妥钠45mg/kg麻醉，每只经股静脉注射肝素600U，迅速取出心脏悬挂于工作心脏的装置中进行灌注。灌注液为改良的K-H液，持续通入95%O2＋5%CO2混合气体，pH 7.4，温度37℃。灌注液由LDB-M电子蠕动泵恒速灌入。离体心脏在左心房插管并扎牢、为顺灌的入口。左心室插管、接换能器连于RM-6000型四道生理仪以记录左心室收缩压(LVSP)、左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)、左室舒张末期压(LVEDP)。主动脉 根部和心尖部安放心电图电极以记录心电图。心脏逆灌10min后转入工作状态，平衡15min后将穿山甲液加入K-H液中。定时收集1min冠脉流出液(CF)和主动脉流出液，将两者相加得心输出量(CO)。用药前后第5，10，15min记录上述各项指标。
1.3 穿山甲对血小板聚集性的影响 冠心病患者15例，取空腹静脉血3ml，制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)。每一血样分成3份用于3组试验：对照组：PRP中加入15μl生理盐水，pH 5.9;穿山甲组：穿山甲液用生理盐水稀释至0.5g/ml，pH 6.0，将15μl穿山甲液加入PRP中；阿司匹林组：阿司匹林为水溶片(又称巴米尔、由阿斯特拉制药有限公司生产)、混悬于生理盐水中，浓度为10mg/ml，原pH 4.8,加NaOH调pH至6.0，将15μl阿司匹林加入PRP中。1min后加入10μl ADP(2μmol/L)以诱导血小板聚集。用比浊法测血小板聚集百分率，仪器为PPP自动平衡血小板聚集仪SPA-3型。
1.4 数据处理 用SPSS统计软件进行t检验，数据以均数±标准差表示。
2 结果
2.1 穿山甲对大鼠离体工作心脏心功能的影响 与本组用药前比较(见表1)，用穿山甲后LVSP显著升高(P＜0.05)，+dp/dtmax和CO非常显著增加(P＜0.01);用药后HR减慢，但无显著意义；不引起-dp/dtmax,LVEDP和CF的明显改变。对照组相当于穿山甲组用药前后时程的上述各指标无显著变化。
表1 穿山甲对大白鼠离体工作心脏心功能的影响
组别 LVSP
kPa +dp/dtmax
kPa/s -dp/dtmax
kPa/s LVEDP
kPa CF
ml/min CO
ml/min HR
次/min
对照 用药前 11.6±1.0 304±39 151±33 -0.04±0.10 8.3±0.77 21.2±1.8 233±30
用药后 12.1±1.0 295±42 153±31 -0.07±0.07 8.2±0.83 21.5±1.9 232±33
穿山甲 用药前 11.9±1.3 306±57 145±26 -0.08±0.13 8.3±1.01 19.8±2.4 229±33
用药后 13.3±1.71) 325±582) 144±27 -0.06±0.09 8.1±0.90 20.8±2.22) 216±26
注：①x±s(下同) ②n=8 与本组用药前比较 1)P＜0.05 2)P＜0.01
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摘要 目的：探讨穿山甲对大鼠离体心脏功能和体外血小板聚集性的影响。方法：制备大鼠离体工作心脏、观察K-H灌注液中加入穿山甲前后的心功能指标变化，并设立对照组；采用15名冠心病患者的静脉血制备富血小板血浆和贫血小板血浆，每一标本分成三部分供三组使用：穿山甲组、阿司匹林组和对照组，以ADP诱导血小板聚集。结果：大鼠离体工作心脏灌注液中加入穿山甲液后，LVSP，+dp/dtmax和CO显著增加，-dp/dtmax,LVEDP及CF无显著变化，这些指标在对照组中无显著变化。与对照组比较，穿山甲和阿司匹林组的血小板聚集百分率显著降低。结论：穿山甲增强心肌收缩功能、有正性肌力作用，还能显著抑制血小板聚集。
关键词 穿山甲 离体工作心脏 心脏收缩和舒张功能 血小板聚集
Effects of Squama Manitis on Cardiac Systolic Function and Platelet Aggregation
Wen Xiuying,Xu Baoguo and Liu Hao (Liyuan Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430077)
Abstract Objective:To study the effect of Squama Manitis(S.M.)on cardiac function and platelet aggregation in vitro.Method:Isolated working rat hearts were prepared,and cardiac performance was measured before and after adding S.M. in the Krebs-Hensleit(K-H) perfusion buffer.Controls with K-H buffer were also investigated. Rich platelet plasma and Poor platelet plasma were centrifuged from the blood of 15 patients with coronary heart disease.Each sample was divided into three parts for use by three groups：control,group of S.M. and group of aspirin.Platelet aggregation was stimulated by adenosine diphosphate.Result:LVSP,＋dP/dtmax and CO of isolated working rat hearts were significantly increased after treating with S.M. liquor.S.M. had no obvious effect on -dP/dtmax and LVEDP.These parameters did not change significantly in the control.Percentages of platelet aggregation were significantly lower in the group of S.M. and the group of aspirin as compared with the control.Conclusion:S.M. increases cardiac systolic function,has positive inotropic effect on myocardium and inhibits platelet aggregation.
Key words Squama Manitis;isolated working heart;cardiac systolic and diastolic function;platelet aggregation
穿山甲属活血化瘀类中药，古书记载穿山甲能治疗“心气痛”［1］，曾见报道穿山甲有延长大白鼠的凝血时间［2］，增加狗股动脉血流量的作用［3］，说明穿山甲对心血管系统有一定的药理效应。本文进一步探讨穿山甲对大鼠离体工作心脏心功能及人血体外血小板聚集性的影响。
1 材料与方法
1.1 药物与制剂 穿山甲为湖北省中药材公司提供，产地广西省，经梨园医院中药研究室副主任药师许明望鉴定为脊椎动物鲮鲤科的穿山甲Manis pentadactyla L.的鳞片。用水提醇沉法制得穿山甲液，每毫升含1g生药，灭菌密封。
1.2 大鼠离体工作心脏的制备及心功能指标观察 Wistar大白鼠，雌性，7～8周龄，体重200～250g，随机分2组，每组8只。对照组：离体心脏持续用Kreb-Hensleit(K-H)液灌注。穿山甲组：离体心脏转入工作状态平衡后于K-H液中加入穿山甲液(终末浓度6mg/ml)。大鼠经腹腔注射戊巴比妥钠45mg/kg麻醉，每只经股静脉注射肝素600U，迅速取出心脏悬挂于工作心脏的装置中进行灌注。灌注液为改良的K-H液，持续通入95%O2＋5%CO2混合气体，pH 7.4，温度37℃。灌注液由LDB-M电子蠕动泵恒速灌入。离体心脏在左心房插管并扎牢、为顺灌的入口。左心室插管、接换能器连于RM-6000型四道生理仪以记录左心室收缩压(LVSP)、左室内压最大变化速率(±dp/dtmax)、左室舒张末期压(LVEDP)。主动脉 根部和心尖部安放心电图电极以记录心电图。心脏逆灌10min后转入工作状态，平衡15min后将穿山甲液加入K-H液中。定时收集1min冠脉流出液(CF)和主动脉流出液，将两者相加得心输出量(CO)。用药前后第5，10，15min记录上述各项指标。
1.3 穿山甲对血小板聚集性的影响 冠心病患者15例，取空腹静脉血3ml，制备富血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)。每一血样分成3份用于3组试验：对照组：PRP中加入15μl生理盐水，pH 5.9;穿山甲组：穿山甲液用生理盐水稀释至0.5g/ml，pH 6.0，将15μl穿山甲液加入PRP中；阿司匹林组：阿司匹林为水溶片(又称巴米尔、由阿斯特拉制药有限公司生产)、混悬于生理盐水中，浓度为10mg/ml，原pH 4.8,加NaOH调pH至6.0，将15μl阿司匹林加入PRP中。1min后加入10μl ADP(2μmol/L)以诱导血小板聚集。用比浊法测血小板聚集百分率，仪器为PPP自动平衡血小板聚集仪SPA-3型。
1.4 数据处理 用SPSS统计软件进行t检验，数据以均数±标准差表示。
2 结果
2.1 穿山甲对大鼠离体工作心脏心功能的影响 与本组用药前比较(见表1)，用穿山甲后LVSP显著升高(P＜0.05)，+dp/dtmax和CO非常显著增加(P＜0.01);用药后HR减慢，但无显著意义；不引起-dp/dtmax,LVEDP和CF的明显改变。对照组相当于穿山甲组用药前后时程的上述各指标无显著变化。
表1 穿山甲对大白鼠离体工作心脏心功能的影响
组别 LVSP
kPa +dp/dtmax
kPa/s -dp/dtmax
kPa/s LVEDP
kPa CF
ml/min CO
ml/min HR
次/min
对照 用药前 11.6±1.0 304±39 151±33 -0.04±0.10 8.3±0.77 21.2±1.8 233±30
用药后 12.1±1.0 295±42 153±31 -0.07±0.07 8.2±0.83 21.5±1.9 232±33
穿山甲 用药前 11.9±1.3 306±57 145±26 -0.08±0.13 8.3±1.01 19.8±2.4 229±33
用药后 13.3±1.71) 325±582) 144±27 -0.06±0.09 8.1±0.90 20.8±2.22) 216±26
注：①x±s(下同) ②n=8 与本组用药前比较 1)P＜0.05 2)P＜0.01
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